高效液相色譜儀色譜柱的使用:
1、 使用前仔細(xì)閱讀色譜柱附帶的說明書,注意適用范圍,如pH值范圍、流動相類型等;
2、 使用符合要求的流動相;
3、 使用保護(hù)柱;
4、 如所用流動相為含鹽流動相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、 色譜柱在不使用時,應(yīng)用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;
6、 不要高壓沖洗柱子;
7、 不要在高溫下長時間使用硅膠鍵合相色譜柱;
高效液相色譜儀色譜柱注意事項:
1)流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2)柱子是非常脆弱的,每次做的方法,先不要讓液體過柱子。
3)所有過柱子的液體均需嚴(yán)格地過濾。
4)壓力不能太大,更好不要超過2000psi
高效液相色譜儀色譜柱的選擇
為什么要使用“保護(hù)柱”
1.使用“保護(hù)柱”,能夠延長色譜柱的使用壽命。簡單的說,“保護(hù)柱”即是很短的色譜柱,填裝和所使用液相色譜柱相同的填料。正確使用裝在液相色譜柱前面的“保護(hù)柱”,可以阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質(zhì)。而達(dá)到延長柱子壽命的效果。如果使用“保護(hù)柱”不當(dāng)會造成反效果。因為都在保護(hù)柱使用過程中。如污染達(dá)到一定程度而沒有及時更換,累積的雜物很可能會沖入色譜柱中,反而會造成色譜柱損壞。因此。使用“保護(hù)柱”時,更重要的是要知道什么時候該保護(hù)柱。該換的時候就必須要立即更換。
2.高品質(zhì)的色柱子
選擇高品質(zhì)的柱子,并注意使用方法;可以延長柱子的使用壽命。一般認(rèn)為同一廠牌、同一型號的柱子之間的品質(zhì)都相同,對品質(zhì)管理很嚴(yán)格的廠家而言,這種說法是成立的。但如果廠家質(zhì)管理不夠嚴(yán)格,即使是同一批號的新柱子之間的品質(zhì)也有差異。所以,選用柱子時必須選擇管理嚴(yán)格的高品質(zhì)柱子,任何柱子使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其如在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下使用,柱子更易產(chǎn)生變化。因此,我們盡量選用pH適用范圍大的柱子。在開發(fā)新分析方法時,許多專家建議不要使用舊柱子。因柱子一經(jīng)使用。柱性會改變;如此一來,使用舊柱子開發(fā)出來的新分析方法,很可能在使用同廠牌的新柱子分析時。發(fā)生無法達(dá)到預(yù)定效果的情況。總的說。開發(fā)新分析方法時使用品質(zhì)好的新主子;并且一直柱子應(yīng)該使用在一種分析方法上;則柱子壽命可以延長。
3.定期沖洗色柱子
定期沖洗柱子可以延長柱子使用壽命。柱子使用一段時間后總會有一些雜質(zhì)累積在柱內(nèi)。這些雜質(zhì)不會隨著流動相出來,自然會逐漸影響柱子的品質(zhì)。這些雜質(zhì)在后來的分析譜圖上出現(xiàn)。而造成出現(xiàn)怪峰、基線不平等現(xiàn)象。簡單的解決方法是用較強(qiáng)的流動相沖洗。更好是在每次分析某一產(chǎn)品完成后沖洗。如果分析時使用緩沖劑時,更好用水來取代緩沖劑。先使用有機(jī)和水的混合溶液為流動沖洗緩沖劑。接著再用100%有機(jī)溶劑沖洗。如果不先用有機(jī)和水的混合溶液沖洗,而直接用100%有機(jī)溶劑沖洗的話,緩沖劑很可能會沉淀出來,而損壞柱子的品質(zhì)。使用10-20倍柱體積的量來沖洗基本就足夠了。專家建議更好將100%有機(jī)溶劑沖洗的條件加在分析實(shí)驗程序完畢的更后,如此一來每天在開機(jī)前都會用100%有機(jī)溶劑沖洗。一般硅膠柱可以反沖洗處理,即是在將沖洗前將柱子倒反接后再沖洗。打算使用反沖洗處理前,更好先參考柱子的保養(yǎng)說明書。
所以要真正保護(hù)柱子,使用柱子的壽命延長,更好是使用“保護(hù)柱”和定期沖洗柱子。