高效液相色譜法(HPLC)是以經(jīng)典的液相色譜法為基礎(chǔ)而發(fā)展起來的一種新型分離分析技術(shù)。因為液相色譜法使用的是粗顆粒作為固定相,填充得不太均勻,需依靠重力使流動相流動,因此在實際操作過程中分析的速度比較慢,使整個過程效率低下。而新型的高效固定相、高壓輸液泵、梯度洗脫技術(shù)以及各式各樣的高靈敏度的檢測器相繼問世,使高效液相色譜法迅速發(fā)展起來。
高效液相色譜儀HPLC檢測器是高效液相色譜儀的關(guān)鍵部件之一, 作用是將流出物的組成和含量變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?通過電子儀器測定 ,從而實現(xiàn)定性定量。目前, HPLC檢測器有30多種。不同檢測器的工作原理不同,對不同的分析對象,響應(yīng)也各不相同。
HPLC檢測器類型
(1)按用途可以分為通用型和選擇型2種,其中通用型檢測器包括蒸發(fā)光散射檢測器、差折光檢測器、質(zhì)譜檢測器等; 而選擇型檢測器包括紫外吸收檢測器、熒光檢測器、化學(xué)發(fā)光檢測器等。
(2)按檢測性質(zhì)可以分為濃度型和質(zhì)量型, 其中濃度型檢測器包括紫外吸收檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器等; 而質(zhì)量型檢測器包括庫侖檢測器、氫火焰檢測器等。
如何選擇HPLC合適的檢測器?
響應(yīng)樣品并有輸出信號,應(yīng)提供檢測器響應(yīng)值與樣品濃度之間的線性關(guān)系,而設(shè)計的校正技術(shù)應(yīng)該促進(jìn)這種關(guān)系
然而:
由于HPLC系統(tǒng)的其他組分的影響,響應(yīng)和濃度之間的關(guān)系將線性偏離,并非所有檢測器都是線性的。受HPLC系統(tǒng)的其他組分的影響,檢測器的性能可能遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于其最佳水平
HPLC檢測器:基本上是沒有一個檢測器能夠適應(yīng)所有的液相色譜分離
溶質(zhì)性質(zhì)檢測器(選擇性):
響應(yīng)溶質(zhì)的物理或化學(xué)性質(zhì),一般不響應(yīng)流動相的變化(選擇性)
整體性質(zhì)檢測器(普通型):
是否有溶質(zhì),它對流動相物理性質(zhì)的任何變化作出反應(yīng)(通用型)
我們理想的HPLC檢測器:
1高靈敏度
2可忽略的基線噪聲
3寬線性范圍
4響應(yīng)獨立于流動相和操作參數(shù)
5對壓力、溫度和流速的變化不敏感
6長期操作的穩(wěn)定性
7低死體積
8無損
9選擇性