具有液相色譜LC前端的串聯(lián)質(zhì)譜MS,特別是三重四極質(zhì)譜(也稱之為“串聯(lián)”)質(zhì)譜(LC-MS/MS),這種儀器在過(guò)去的十幾年里逐漸取代了GC-MS和單四極質(zhì)譜監(jiān)測(cè)器(LC-MS),成為質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)中用到的主要儀器之一。
液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)LC-MS/MS儀器包括大氣壓電離源,通常為ESI源或大氣壓化學(xué)電離源,由離子入口和聚焦組件耦合,提供從大氣壓到真空的轉(zhuǎn)換和離子聚焦,進(jìn)入第一質(zhì)量過(guò)濾裝置,接著進(jìn)入碰撞室,該碰撞室充滿用于碰撞誘導(dǎo)離解的低壓氣體,接著進(jìn)入第二質(zhì)量過(guò)濾裝置,最后進(jìn)入離子檢測(cè)器(電子倍增器)。
液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)儀可以在儀器靈敏度和質(zhì)量分辨率范圍內(nèi)進(jìn)行五種不同的掃描模式:
1.全掃描:掃描兩個(gè)質(zhì)量過(guò)濾器的整個(gè)(或部分)質(zhì)量范圍,而碰撞室不包含任何碰撞氣體。此試驗(yàn)可以查看樣品中包含的所有離子。
2.子離子掃描:在第一質(zhì)量過(guò)濾裝置中選擇一個(gè)特定的m/Q,用碰撞氣體填充碰撞室使所選m/Q破裂,然后掃描第二質(zhì)量過(guò)濾裝置的整個(gè)(或部分)質(zhì)量范圍。該實(shí)驗(yàn)可以查看所選前體離子的所有碎片/產(chǎn)物離子。
3.前體離子掃描:掃描第一質(zhì)量過(guò)濾裝置的整個(gè)(或部分)質(zhì)量范圍,在碰撞室中填充碰撞氣體,將掃描范圍內(nèi)的所有離子碎片化,然后第二質(zhì)量過(guò)濾裝置選擇一個(gè)特定的m/Q分析。此實(shí)驗(yàn)可以通過(guò)檢測(cè)產(chǎn)物離子和檢測(cè)之前的m/Q的時(shí)間相關(guān)性,確定哪個(gè)m/Q前體離子可能產(chǎn)生所選產(chǎn)物離子。
4.中性丟失掃描:在第一質(zhì)量過(guò)濾裝置的整個(gè)(或部分)質(zhì)量范圍內(nèi)掃描,用碰撞氣體填充碰撞室使掃描范圍內(nèi)的所有離子破碎,然后在預(yù)定范圍內(nèi)掃描第二質(zhì)量過(guò)濾裝置,該預(yù)定范圍對(duì)應(yīng)前體掃描范圍內(nèi)每個(gè)潛在離子發(fā)生的特定質(zhì)量的破裂引起的損失。該實(shí)驗(yàn)可以識(shí)別失去選定的通用化學(xué)基因的所有前體。
5.選擇(或多個(gè))反應(yīng)檢測(cè)(SRM或MRM):在第一質(zhì)量過(guò)濾裝置選擇一個(gè)特定的m/Q,用碰撞氣體填充碰撞室,將選定的m/Q碎裂,然后第二質(zhì)量過(guò)濾裝置從這些片斷中選擇一個(gè)特定的m/Q進(jìn)行分析。這個(gè)實(shí)驗(yàn)可以對(duì)第一質(zhì)量過(guò)濾裝置中的分析物進(jìn)行特定的檢測(cè),已知該m/Q是特定于第二質(zhì)量過(guò)濾裝置選擇的產(chǎn)物離子的片段。對(duì)于這個(gè)特定的離子對(duì)檢測(cè)靈敏度也大大提高,因?yàn)闄z測(cè)器現(xiàn)在主要處理這個(gè)單一分析物待定的離子對(duì),并且可以在幾個(gè)周期內(nèi)重復(fù)這樣做。