液相色譜儀HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)是通用型檢測器,可以檢測沒有紫外吸收的有機物質(zhì),如人參皂苷、黃芪甲苷等。作為通用型檢測器用于高效液相色譜、超臨界色譜(SFC)和逆流色譜中。
液相色譜儀HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器工作原理
利用流動相與試樣組分之間蒸汽壓差,在流動相揮發(fā)除去的基礎上,不揮發(fā)性組分粒子可以使激發(fā)光源中發(fā)出的光收到散射,并通過光電倍增管將散射光轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?/span>
首先將柱狀洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中蒸發(fā)溶劑,最后在光散射檢測池中檢測剩余的非揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒
1。霧化:在載氣壓力的作用下,液體流動相在霧化室內(nèi)變成小液滴,使溶劑更容易蒸發(fā)。液滴的大小和均勻性是確保檢測器靈敏度和重復性的重要因素,蒸發(fā)光散射檢測器通過精確控制空氣壓力和溫度,確保霧化室內(nèi)形成窄的液滴大小分布,從而大大降低液滴蒸發(fā)所需的溫度
2。蒸發(fā):載氣將霧滴從霧化室輸送到漂移管進行蒸發(fā)。在漂移管中,溶劑被去除,留下純?nèi)苜|(zhì)的顆?;蛞旱巍U舭l(fā)光散射檢測器采用低溫蒸發(fā)模式,以保持顆粒的均勻性,對半揮發(fā)性物質(zhì)和熱敏化合物具有良好的靈敏度
3。檢測:光源是激光。溶質(zhì)顆粒從漂移管中出來,進入光探測單元,并通過激光束。溶質(zhì)顆粒散射的光通過光電倍增管收集。溶質(zhì)顆粒在進入光探測罐時被輔助載氣包裹,避免了溶質(zhì)在探測罐壁上的分散和沉淀,大大提高了探測靈敏度,大大減少了對探測罐表面的污染。
液相色譜儀HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器的優(yōu)點
蒸發(fā)光散射檢測器最大的優(yōu)越性在于能檢測不含發(fā)色團的化合物,如:碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物,并在沒有標準品和化合物結構參數(shù)未知的情況下檢測未知化合物 。
1 任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測;
2 靈敏度比示差折光檢測器高,對熱不穩(wěn)定和揮發(fā)性化合物亦有較高靈敏度;
3 對溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用
4 廣泛的梯度和溶劑兼容性,無溶劑峰干擾;
5 輔助載氣提高了檢測靈敏度,保持檢測池內(nèi)的清潔,避免污染;
6 高精度霧化和蒸發(fā)溫度控制,保證高精度檢測;
液相色譜儀HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器的缺點
1 不適合測定可揮發(fā)和半揮發(fā)性化合物;
2 流動相必須是可揮發(fā)的
3 和高效液相色譜連接時需要信號轉(zhuǎn)換,如:和安捷倫液相相配時需要一個數(shù)模轉(zhuǎn)換器(35900E)
4 使用不是很方便,需要配置高壓氮氣或空氣,且實驗中產(chǎn)生有害廢氣。
5 價格比較貴