移液器的操作是科學(xué)試驗的第一步,是一個非常基礎(chǔ)的試驗操作, 很多初次使用移液器的人,總以為移液器的操作非常簡單。其實移液器的操作學(xué)問很多。而正確合理的使用移液器可以使實驗結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。
移液器移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定中的加樣時使用正向置換移液器。如移取15ul的液體,最好選擇最大量程為20ul的移液器,選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠準(zhǔn)確。
科學(xué)正確使用和操作移液器:
1、范圍選定:不同型號的微量移液器,各有其吸取體積范圍,請按取用溶液體積取用適當(dāng)量程微量移液器。
2、設(shè)定移液體積:設(shè)定體積時,由低旋轉(zhuǎn)至高值,要先超越所欲設(shè)定值至少1/3轉(zhuǎn)后,再反轉(zhuǎn)至設(shè)定值;由高旋轉(zhuǎn)至低值,則直接轉(zhuǎn)至設(shè)定值即可。請勿將體積調(diào)整圈轉(zhuǎn)到超過最低或最高的使用范圍。
3、吸頭安裝:吸頭的安裝要采用旋轉(zhuǎn)安裝法,把移液器頂端挨近吸頭,在輕輕用力下壓的同時,把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180度。切勿用力過猛,避免損傷移液器并影響其精準(zhǔn)度。
4、移液工作:在轉(zhuǎn)移液體時應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸放2-3次,可讓吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜,確保移液工作的精度和準(zhǔn)度。
5、吸液操作:吸取液體時,吸頭浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變,勿將微量移液器本體浸入溶液中。取樣加樣過程中應(yīng)注意移液吸頭不能觸及其他物品,以免被污染。吸取一般液體時,手指按壓按鈕至第1檔,盡可能保持微量移液器垂直,將微量移液器尖端浸入溶液,再緩慢釋放按鈕。等1秒后將吸頭提離液面,貼壁停留1~3秒,使管尖外側(cè)的液滴滑落。釋放按鈕不可太快,以免溶液沖人吸管柱內(nèi)而腐蝕活塞。
在移取粘稠或易揮發(fā)的液體時,很容易導(dǎo)致較大的體積誤差,建議采取以下方法提高移液準(zhǔn)確性。吸取粘度高之試液,請先將微量移液器頭尖端以刀片或剪刀將出口切大,并先行預(yù)潤后再吸取。移液前先反復(fù)吸打液體幾次使吸頭預(yù)濕,吸液或排出液體時最好多停留幾秒,尤其在移取較大體積液體時。采用反相移液法,吸液時按到第二檔慢慢松開控制按鈕,部分液體殘留在吸頭內(nèi)。吸取酸液或液后,應(yīng)將微量移液器拆解開,各部位零沖洗干凈,擦干后再正確組合恢復(fù)原狀。
6、排液和放置:排放液體時,保持一定傾斜度,將吸頭尖端貼到容器內(nèi)壁平穩(wěn)按壓按鈕至第一停點,等1秒后再把按鈕壓至第二停點以排出剩余液體。壓住按鈕同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁擦過松開按鈕。然后利用移液器本身的彈射功能,棄去吸頭至回收設(shè)備或廢物設(shè)備中,并妥善處理。