大氣壓離子化技術(shù)(API)是一類軟離子化方式,它的出現(xiàn),成功地解決了
二手LC-MS
液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用的接口問(wèn)題,使二手LC-MS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用逐漸發(fā)展成為成熟的技術(shù)。API主要包括電噴霧離子化(ESI)、離子噴霧離子化(ISI)和大氣壓化學(xué)離子化(APCI)3種模式。它們的共同點(diǎn)是樣品的離子化在處于大氣壓下的離子化室完成,離子化效率高,大大增強(qiáng)了分析的靈敏度和穩(wěn)定性。ESI,ISI和APCI,3種電離方式同時(shí)可作為二手LC-MS的接口。
離子噴霧技術(shù)(onspray Ionization,ISI)
大多
二手LC- MS 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用
都要求有盡可能高的LC流速達(dá)到接口,目前ISI接口的最佳流速可達(dá)到50~ 200u1 -min比原來(lái)的提高了10~ 20倍。在柱子出口和ESI探針間加一個(gè)溶劑N分離器可使柱流速?gòu)腎ml .min減少到100ul.min進(jìn)入接口探針而對(duì)響應(yīng)無(wú)不良影響。
當(dāng)樣品有限時(shí),可應(yīng)用在低于1ulmin流速下有效工作的納(nano)一ESI接口。有靜態(tài)及動(dòng)態(tài)兩種nano- ESI接口,靜態(tài)nano- ESI裝置常特殊應(yīng)用于鑒定蛋白質(zhì).而動(dòng)態(tài)nano- ESI裝置與毛細(xì)管電泳nano- LC微毛細(xì)管LC或毛細(xì)管電色譜聯(lián)用。流速常在30~ 1000nl.min .
離子噴霧技術(shù)(onspray Ionization,ISI) 的作用機(jī)制
樣品是經(jīng)氣動(dòng)霧化形成液滴。
氣動(dòng)噴霧器裝置_---離子源的出口處有氮?dú)夂?,溶劑化的分子通過(guò)氣簾和大氣壓與真空之間的小孔時(shí)被脫去溶劑,它可擋住溶劑、緩沖液進(jìn)入分析區(qū)域有利于樣品離子脫溶劑化、去簇化和維持真空系統(tǒng),保持分析器的潔凈。
離子噴霧技術(shù)(onspray Ionization,ISI)與ESI的比較
1、流速
ESI在低流速和流動(dòng)相中,水的百分比較低時(shí),才能有良好的靈敏度和穩(wěn)定性;
ISI采用氣動(dòng)噴霧裝置允許洗脫液有較大的流速和高的水百分比。流速可達(dá)0.2 ml/min。但實(shí)驗(yàn)證明流速在40μul/ min時(shí)靈敏度最佳
2、產(chǎn)生多電荷離子,可分析分子量高達(dá)幾十萬(wàn)道爾頓的蛋白質(zhì)。