液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因?
1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子。
3、可能柱超載,減少進樣量。
HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法是什么?
1、樣品量不足,解決辦法為增加樣品量
2、樣品未從柱子中流出??筛鶕?jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子
3、樣品與檢測器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器
4、檢測器衰減太多。調(diào)整衰減即可。
5、檢測器時間常數(shù)太大。解決辦法為降低時間參數(shù)
6、檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
7、檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。
8、記錄儀測壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。
9、流動相流量不合適。調(diào)整流速即可。
10、檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。
怎樣解決做HPLC分析時,柱壓不穩(wěn)定,原因何在?
1、泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對溶劑進行脫氣處理;
2、比例閥失效,更換比例閥即可;
3、泵密封墊損壞,更換密封墊即可;
4、溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;
5、系統(tǒng)檢漏,找出漏點,密封即可;
6、梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。
出現(xiàn)峰展寬的原因?
1、樣品體積過大——用流動相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%。
2、在進樣閥中造成峰擴展——進樣前后排出氣泡以降低擴散。
3、數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢——設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點。
4、檢測器時間常數(shù)過大——設(shè)定時間常數(shù)為感興趣第一峰半寬的10%。
5、流動相粘度過高——增加柱溫,采用低粘度流動相。
6、檢測池體積過大——用小體積池,卸下熱交換器。
7、保留時間過長——等度洗脫時增加強溶劑含量,也可用梯度洗脫。
8、柱外體積過大——將連接管徑和連接管長度降至最小。
9、樣品過載——進小濃度小體積樣品。
簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏?
設(shè)定泵使用一個單獨通路(A),打開Purge閥,流速5mL/min,提起其他溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭直至離開液面,觀察這些通路(B、C、D)內(nèi)的溶劑是否隨著流動,正常時均不應(yīng)流動。