高效實現(xiàn)強大的MRM3定量方法
AB Sciex公司推出的Qtrap 5500系統(tǒng)具備高的靈敏度、好的阱內(nèi)裂解效率、快的掃描速度以及更快的MRM3掃描方式。在分析生物樣品時,樣品一般都較為復(fù)雜,所以在某些特殊的情況下,分析人員需要選擇性更高的檢測技術(shù),MRM3技術(shù)便能夠幫助分析人員解決上述問題。
所謂MRM3掃描方式就是通過Qtrap 5500質(zhì)譜系統(tǒng)與液相色譜相配合,在Q1選擇一個前體離子,在Q2中將該離子進行碎裂,與MRM掃描方式不同在于MRM3掃描方式是將所有的碎片離子聚集在線性加速離子阱中,之后,在離子阱中以高達10K或20KDa/Sec的速度掃描特定的二代碎片離子,從而獲得MRM3譜圖。
(1)MRM掃描背景噪音較高,或譜圖中有干擾峰存在;(2)通過更換流動相、優(yōu)化液相色譜條件、選擇不同的MRM離子對、選擇不同的離子化方式等這些簡單方法無法消除背景噪音;(3)與背景噪音相比,沒有特定的MRM子離子可用,在遇到上述這些干擾和困難時,MRM3就是一種有效的定量策略。
脂質(zhì)分析
脂類物質(zhì)是細胞膜的重要組成成分,在細胞功能上扮演著重要的角色,所有的脂類都有一個極性頭部和熟睡的尾巴,或至少是代謝后生成此類分子。作為細胞能量儲存,并且參與細胞間的信息交換。了解脂類代謝途徑有益于設(shè)計高效且副作用小的藥物,對于生物體生理過程和藥物設(shè)計有著重要的意義。譬如阿司匹林、布洛芬與脂類代謝相關(guān),降低膽固醇的他汀藥物,也能戲劇性的改變脂類代謝。
傳統(tǒng)研究脂類物質(zhì)的技術(shù)方法包括有:薄層層析、氣相色譜以及氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)。氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)通常分析經(jīng)分離純化的脂類衍生物,但衍生化方法通常易導(dǎo)致脂類發(fā)生變化,破壞了脂類分子的完整性。
液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)可以解決上述問題,幫助分析人員鑒定脂類、了解脂類類別、獲得脂類的表達譜、比較脂類表達譜、獲得結(jié)構(gòu)信息、測定分子量以及代謝物定量。LC/MS/MS不同于GC/MS,它可使研究人員能夠觀察到完整的脂類分子,直觀地看到何種脂肪酸連接在頭部基團上。
多重全體離子掃描方式(MPIS)
多重全體離子掃描方式具體指指固定在Q3掃描某個碎片離子,通過分析檢測出哪個前體離子會產(chǎn)生出該碎片離子,并將該離子的信號記錄下來。通過這樣反復(fù)不斷地掃描,便可以推導(dǎo)出哪些前提離子將會產(chǎn)生某一個碎片離子。該方法的技術(shù)優(yōu)勢在可對所有感興趣的脂類分子和內(nèi)標(biāo)分子進行平行檢測,圖譜了直觀解析并可以疊加用于復(fù)雜脂類的定性分析,可方便的從前提離子掃描切換到MRM掃描,用于脂類分子的定量分析。