熒光檢測(cè)器是液相色譜儀HPLC中常用的檢測(cè)器之一,在醫(yī)藥、生化、有機(jī)合成等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。FLD檢測(cè)器適用于本身能發(fā)射或衍生化后能產(chǎn)生熒光的化合物。
熒光(Fluorescence)檢測(cè)原理:發(fā)熒光的化合物吸收光(UV或VIS)使其分子達(dá)到激發(fā)態(tài),當(dāng)其返回到基態(tài)時(shí)發(fā)射光的現(xiàn)象,稱為熒光,熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比。
液相色譜儀HPLC熒光檢測(cè)器(FLD)
優(yōu)點(diǎn):
1,熒光檢測(cè)器靈敏度高,pg級(jí)檢測(cè),比紫外檢測(cè)器約高2-3個(gè)數(shù)量級(jí),可達(dá)到10-12g/mL
2,選擇性好,只對(duì)有熒光的物質(zhì)有響應(yīng),避免不發(fā)熒光物質(zhì)的干擾;
3,zui小檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng/mL,可用于多環(huán)芳烴和各種熒光物質(zhì)的痕量分析;
4,所需樣品量少,特別適合藥物和生化樣品分析;
5,若流動(dòng)相溶劑不產(chǎn)生熒光,也可用于梯度洗脫
缺點(diǎn):
適用于檢測(cè)能產(chǎn)生熒光的物質(zhì);
不是所有化合物都有熒光,必要時(shí)需要衍生;
線性范圍不如紫外檢測(cè)器寬;
液相色譜儀HPLC熒光檢測(cè)器的應(yīng)用
--環(huán)境中的污染物
--多環(huán)芳烴(PAH),多酚,氨基甲酸酯等。。。
--食品、飲料
--食品中的毒素;例如,黃曲霉毒素;
--染料;
--維生素及衍生氨基酸;
--生物技術(shù)及制藥熒光檢測(cè)器
熒光檢測(cè)器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測(cè)器,可檢測(cè)能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物,再進(jìn)行熒光檢測(cè)。其zui小檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外檢測(cè)器約高2個(gè)數(shù)量級(jí),但其線性范圍不如紫外檢測(cè)器寬。近年來(lái),采用激光作為熒光檢測(cè)器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器極大地增強(qiáng)了熒光檢測(cè)的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。