安捷倫液相色譜柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達(dá)到效率,除柱外死體積要小外,也要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù),即使好的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng),這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍料徑的厚度,在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
由于柱體積越來越小,柱外效應(yīng)的影響就更加好,需要更小池體積的檢測(cè)器(甚至采用柱上檢測(cè)),配套使用的設(shè)備應(yīng)具備如下性能:輸液泵能精密輸出1~100ul/min的低流量,進(jìn)樣閥能準(zhǔn)確、重復(fù)地進(jìn)樣微小體積的樣品,且因進(jìn)樣量小,要求高靈敏度檢測(cè)器,電化學(xué)檢測(cè)幫質(zhì)譜儀在這方面具有突出優(yōu)點(diǎn)。
與所有其他色譜方法一樣,色譜柱是進(jìn)行液相色譜分離的核心部位,發(fā)生在色譜柱中的分離過程,均受熱力學(xué)因素和動(dòng)力學(xué)因素的控制。為得到滿意的分離,首先必須考慮固定相的性質(zhì)及其與溶質(zhì)相互作用的強(qiáng)弱,這主要體現(xiàn)在色譜柱填料的設(shè)計(jì)、合成及選擇上,為使分離的譜帶展寬盡可能地小,就需要對(duì)柱子進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)并將填料填充成性能優(yōu)良的柱子。
安捷倫液相色譜柱可以按其分離模式,也可以按其分離的規(guī)模來進(jìn)行分類,此外,隨著色譜技術(shù)的發(fā)展,不斷有新的柱型出現(xiàn),這種柱子不是以微粒型填料填裝的,而是在柱子中通過可控制的聚合反應(yīng)或其他相分離過程直接形成連續(xù)、整體型柱床,此外在柱外制備連續(xù)柱床后整塊裝入柱中的方法也應(yīng)屬于此類柱子。
與傳統(tǒng)全多孔填料相比,安捷倫液相色譜柱可以帶來高度改良的柱效,能夠提升分離度、改善生產(chǎn)率、減少溶劑消耗并降低成本,與當(dāng)前所使用的色譜柱相比,都能夠?yàn)槟鷰硪庀氩坏降男阅芴嵘?/p>