檢測器是二手液相色譜檢測器的核心部分,其將液體的成分、濃度以及含量信息經(jīng)過分析檢測進行輸出,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。其中,紫外檢測器具有較高的靈敏度和廣泛的應(yīng)用范圍,是液相色譜中使用zui廣泛的檢測器。
解決
二手液相色譜
各檢測器基線噪音較大和污染問題
1)基線噪音較大的問題
對于紫外檢測器,氘燈光源打開后要預(yù)熱30分鐘以上,基線才能穩(wěn)定。氘燈用的過久,接近受命期時(氘燈的壽命約束1000小時),會使基線噪音明顯增加,應(yīng)及時更換氘燈。除光源外,流路中的氣泡也會產(chǎn)生噪音。怎樣判斷基線噪音增大是由于光源燈的老化還是來自流路中的氣泡?可將泵關(guān)上,繼續(xù)走基線,如果噪音立即停止,基線呈一條直線,說明基線噪音來自流動相中的氣泡,應(yīng)設(shè)法排氣;若停泵后仍有噪音出現(xiàn),應(yīng)考慮是燈的問題。
電化學(xué)檢測器中的工作電極(安培型)對氣泡十分敏感,儀器的平衡時間較長。流路中如果有氣泡存在,不僅基線會出現(xiàn)尖峰,還會影響檢測。因此,做電化學(xué)檢測時,流動相的配制要很嚴(yán)格,水要超純、除還原物,配好后一定要過濾脫氣,還應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。如果泵系統(tǒng)不是PK材料,即電化學(xué)分析專用儀器,而是普通的高效液相色譜不銹鋼泵,應(yīng)對系統(tǒng)中的不銹鋼材料的輸液泵、進樣器和管道,在分析前用6mol/L硝酸溶液鈍化(注意斷開分離柱),可縮短基線平衡時間。還可在流動相中加入EDTA離子隱蔽劑,也是可以的。如果有較大的氣泡進到檢測器中,光靠泵沖有時太慢,可暫時將泵停止,關(guān)上電化學(xué)檢測器,拆下工作電極,用超純水沖洗電極表面,也很奏效的。
2)檢測器污染的問題
管道污染阻塞是檢測器常見故障。當(dāng)流動相用了緩沖鹽更換流動相又不當(dāng)時,常會在檢測器管路中產(chǎn)生沉淀,可先用5倍柱積的水沖洗,再用10倍柱積的強溶劑(如乙腈)流過,再用50倍的柱體積的異丙醇沖洗,最后換上反相流動相平衡。當(dāng)檢測器管路堵塞時,可表現(xiàn)為柱壓升高,此時,應(yīng)和柱頭堵塞相區(qū)分。可斷開柱子,直接接檢測器,如泵壓仍較高,可判斷壓力升高是由于檢測器管道堵塞造成。檢測器進口是常發(fā)生阻塞的地方,正向沖洗效果常不明顯,我們的經(jīng)驗是將檢測器進出口管道對調(diào),用6mol/L硝酸溶液反沖檢測器,能很快將阻塞沖開,但要注意用低流速沖洗,觀察壓力變化。
大量較臟的樣品(如血漿、尿液)或用的過久,應(yīng)用化學(xué)法或物理拋光法對電極表面進行清潔,可提高一定的檢測靈敏度,但要注意,最后一定要用純水沖洗干凈,不要帶來其它污染。檢測池阻塞和污染多見紫外檢測器。池阻塞也可用上述方法反沖,一般都能疏通。通常,池阻塞的故障比較少見,而池污染常發(fā)生,如不干凈的樣品在池窗上積聚等,都會造成檢測池污染。表現(xiàn)為基線噪音增大,儀器靈敏度下降??捎米⑸淦饕来嘶爻楫惐肌?mol/L硝酸,要小心操作,將池中的污物沖洗干凈,最后用100ml純水正向沖洗檢測池。反向沖洗還可防止池滲漏。對于電化學(xué)檢測器,要注意維護工作電極表面的清潔度,當(dāng)檢測器檢測了 大量較臟的樣品(如血漿、尿液)或用的過久,應(yīng)用化學(xué)法或物理拋光法對電極表面進行清潔,可提高一定的檢測靈敏度,但要注意,最后一定要用純水沖洗干凈,不要帶來其它污染。