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檢測(cè)系統(tǒng)：二手高效液相色譜的檢測(cè)器很多，最常用的有紫外檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器等。
1，紫外檢測(cè)器
紫外檢測(cè)器是二手液相色譜中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器，適用有紫外吸收物質(zhì)的檢測(cè)。在進(jìn)行高效液相色譜分析的樣品中，約有80％的樣品可以使用這種檢測(cè)器。
紫外檢測(cè)器的工作原理如下：由光源產(chǎn)生波長(zhǎng)連續(xù)可調(diào)的紫外光或可見(jiàn)光，經(jīng)過(guò)透鏡和遮光板變成兩束平行光，無(wú)樣品通過(guò)時(shí)，參比池和樣品池通過(guò)的光強(qiáng)度相等，光電管輸出相同，無(wú)信號(hào)產(chǎn)生；有樣品通過(guò)時(shí)，由于樣品對(duì)光的吸收，參比池和樣品池通過(guò)的光強(qiáng)度不相等，有信號(hào)產(chǎn)生。根據(jù)朗伯—比爾定律，樣品濃度越大，產(chǎn)生的信號(hào)越大， 這種檢測(cè)器靈敏度高，檢測(cè)下限約為 10(-10) g／ml，而且線性范圍廣，對(duì)溫度和流速不敏感，適于進(jìn)行梯度洗脫。
2，示差折光檢測(cè)器
示差折光檢測(cè)器是根據(jù)不同物質(zhì)具有不同折射率來(lái)進(jìn)行組分檢測(cè)的。凡是具有與流動(dòng)相折射率不同的組分，二手液相色譜均可以使用這種檢測(cè)器。如果流動(dòng)相選擇適當(dāng)，可以檢測(cè)所有的樣品組分。
示差折光檢測(cè)器分為反射式和沂射式兩種。反射式示差折光檢測(cè)器是根據(jù)下述原理制成的：光在兩種不同物質(zhì)界面的反射百分率與入射角和兩種物質(zhì)的折射率成正比。如果入射角固定，光線反射百分率僅與這兩種物質(zhì)的沂射率成正比。光通過(guò)僅有流動(dòng)相的參比池時(shí)，由于流動(dòng)相組成不變，故其折射率是固定的；光通過(guò)工作池時(shí)，由于存在待測(cè)組分而使折射串改變，從而引起光強(qiáng)度的變化，測(cè)量光強(qiáng)度的變化，即可測(cè)出該組分濃度的變化。偏轉(zhuǎn)式示差折光檢測(cè)器是根據(jù)下述原理：當(dāng)一束光透過(guò)折射率不同的兩種物質(zhì)時(shí)，此光束會(huì)發(fā)生一定程度的偏轉(zhuǎn)，其偏轉(zhuǎn)程度正比于兩物質(zhì)折射率之差。
示差折光檢測(cè)器的優(yōu)點(diǎn)是通用性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便；缺點(diǎn)是靈敏度低，最小檢出限約為 10(-7)g/ml ，不能做痕量分析。此外，由于洗脫液組成的變化會(huì)使折射率變化很大，因此，這種檢測(cè)器也不適用于梯度洗脫。
3，熒光檢測(cè)器
物質(zhì)的分子或原子經(jīng)光照射后，有些電子被激發(fā)至較高的能級(jí)，這些電子從高能級(jí) 躍至低能級(jí)時(shí)，物質(zhì)會(huì)發(fā)出比入射光波長(zhǎng)較 長(zhǎng)的光，這種光稱為熒光。在其他條件一定的情況下，熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比。許多有機(jī)化合物具有天然熒光活性，另外，有些化合物可以利用柱后反應(yīng)法或柱前反應(yīng)法加入熒光化試劑，使其轉(zhuǎn)化為具有熒光活性的衍生物。在紫外光激發(fā)下，熒光活性物質(zhì)產(chǎn)生熒光，由光電倍增管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)。
熒光檢測(cè)器是一種選擇性檢測(cè)器，它適合于二手液相色譜測(cè)定稠環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素、蛋 白質(zhì)等熒光物質(zhì)。這種檢測(cè)器靈敏度非常高，其檢出限可達(dá)10(-12)_10 (-13)g/ml，比紫外檢測(cè)器高2—3個(gè)數(shù)量級(jí)，適合于痕量分析 。而且可以用于梯度洗脫。其缺點(diǎn)是適用范圍有一定的局限性。
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