二手HPLC高效 液相色譜儀
氣相色譜法是一種很好的分離、分析方法,它具有分析 速度快、分離效能好和靈 敏度高等優(yōu)點。 就其分離機理的不同,高效液相色譜可以分為液/固吸附色譜、 液/液分配色譜、 離子交換色譜和凝膠滲透色譜四類。 液/固色譜的色譜柱內(nèi)填充固體吸附劑,由于不同組分 具有不同的吸附能力,因此, 流動相帶著被測組分經(jīng)過色譜柱時,各組分被分開。 液/液色譜的流動相和固定相都是液體。作為固定相的液體涂在惰性擔(dān)體上, 流動相與固定液不互溶。當(dāng)帶有被測組分的流動相進 入色譜柱時,組分在兩相間很快達分配平衡,由于各組分在兩相間分配系數(shù)不同而彼此分離。離子交換色譜的色譜柱內(nèi)填充離子交換樹脂,依靠樣品離子交換能力的差別實現(xiàn)分 離。而凝膠色譜是按試樣中分子大小的不同來進行分離的。 在上述四類色譜中,應(yīng)用最廣泛的是液—液色 譜,因此,在本節(jié)的討論中以液—液 色譜為主。 二手HPLC高效液相色譜 的基本理論和定性定量分析方法與氣相色譜基本相同。二手HPLC高效液相色譜儀由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。
(1)二手HPLC 液相色譜儀-輸液系統(tǒng)
二手HPLC高效液相色譜的輸液系統(tǒng)包括流動相貯存器、高壓泵和梯度淋洗裝置。流動相貯存器為不銹鋼或玻璃制成的容器,可以貯存不同的流動相。高壓泵是高效液相色譜儀最重要的部件之一。由于高效液相色譜儀所用色譜柱直徑細,固定相粒度小,流動相阻力大,因此,必須借助于高壓泵使流動相以較快的速度流過色譜這。高壓泵需要滿足以下條件:能提供150-450kg/cm2的壓強;流速穩(wěn)定,流量可以調(diào)節(jié);耐腐蝕。目前所用的高壓泵有機械泵和氣動放大泵兩種。梯度淋洗裝置可以將兩種或兩種以上的不同極性溶劑, 一定程序連續(xù)改變組成,以達到提高分離效果,縮短分離時間的目的。它的作用與氣相色譜中的程序升溫裝置類似。
梯度淋洗裝置分為兩類:一類叫外梯度裝置;一類內(nèi)梯度裝置。外梯度裝置是流動相在常壓下混合,靠一臺高壓泵壓至色譜柱;內(nèi)梯度裝置是先將溶劑分別增壓后,再由泵按程序壓入混合室,再注入色譜柱。
(2)二手HPLC 液相色譜儀-進樣系統(tǒng)
二手HPLC 進樣器是將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。
分離系統(tǒng)進樣系統(tǒng)一般高效液相色譜多采用六通閥進樣。先由注射器將樣 品常壓下注入樣品環(huán)。然后 切換閥門到進樣位置,由高壓泵輸送的流動相將樣品送人色譜柱。樣品環(huán)的容積是固定的,因此進樣重復(fù)性好。
(3)二手HPLC 液相色譜儀- 分離系統(tǒng) 色譜柱對樣品進行分離,是整個色譜系統(tǒng)的心臟,它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
二手HPLC分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管、恒溫器等。色譜柱是高效液相色譜儀的心臟。它是 由內(nèi)部拋光的不銹鋼管制成,一般長10—50cm,內(nèi)徑2—5mm,柱內(nèi)裝有固定相。液相色譜的固定相是將固定該涂在擔(dān)體上而成。擔(dān)體有兩類:一類是表面多孔型擔(dān)體;另一類是全多孔型擔(dān)體。
近年來又出現(xiàn)了全多孔型微粒擔(dān)體。這種擔(dān)體檢度為5—10 um,是由nm級的硅膠微粒堆積而成,又叫堆積硅珠。由于顆粒小,所以柱效高,是目前最廣泛使用的一種擔(dān)體。 在高效液相色譜分析中,適當(dāng)提高柱溫可改善傳質(zhì),提高桂效,縮短分析時間。因 此,在分析時可以采用帶有恒溫加熱系統(tǒng)的金屬夾套來保持色譜拄的溫度。溫度可以在室溫到60℃間調(diào)節(jié)。
(4)二手HPLC液相色譜儀-檢測系統(tǒng)
二手HPLC高效液相色譜的檢測器很多,最常用的有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器等。
(5)二手HPLC液相色譜儀-數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)
二手HPLC 對色譜數(shù)據(jù)進行處理,并參與HPLC儀器的自動控制。